基于超高灵敏度NGS技术的FLT3-ITD MRD 检测

微小残留病（MRD）是急性髓系白血病（AML）预后评估、危险分层及临床治疗决策的核心指标，与疾病复发密切相关。其中，FLT3-ITD作为AML的高频突变基因，与患者预后不良显著相关，对其MRD的动态监测尤为关键。

FLT3-ITD MRD 常见检测技术对比

FLT3-ITD MRD的不同检测方法在灵敏度、适用范围及临床实用性上各有优劣（见下图）。其中，超高灵敏度NGS（UHS-NGS）凭借标准化检测流程与超高灵敏度，展现出显著的临床优势。

超高灵敏度NGS检测FLT3-ITD MRD的临床价值

1. 精准预后评估¹

FLT3-ITD MRD 水平是 AML 患者复发和生存的强预测因子，低水平 MRD（尤其是 VAF<0.001%）提示预后良好，而高水平MRD（VAF≥1%）与早期复发及不良生存密切相关。

2. 指导靶向用药²

Ⅲ期BMT-CTN 1506试验显示，高灵敏度NGS检测的FLT3-ITD MRD 水平，与患者无复发生存期及复发风险显著相关。围移植期只要可检出 FLT3-ITD MRD，采用吉瑞替尼维持治疗即可明显降低复发风险、延长无复发生存期；而MRD完全阴性患者，使用吉瑞替尼无明显获益。这提示可依据超高灵敏度MRD监测结果，筛选吉瑞替尼潜在获益人群。

基于ELN指南的FLT3-ITD MRD监测策略

2025年ELN指南³针对AML患者的FLT3-ITD MRD检测提出了明确建议。

1. 检测方法：针对FLT3-ITD突变AML患者，在强化化疗后及异基因造血细胞移植（allo-HCT）前，建议通过UHS-NGS进行FLT3-ITD MRD评估，检测下限（LOD）需达到10-4-10-5。

2. 样本类型：2个疗程强化化疗后、allo-HCT前，以及治疗结束（EOT，巩固治疗后/allo-HCT后）时间点，优先选用骨髓样本，优于外周血；随访期间可采用骨髓或外周血样本。

3. 监测时机：指南推荐2个疗程强化化疗后、allo-HCT前进行MRD检测。综合研究证据与专家意见，推荐在治疗结束（EOT）时及随访期间进行MRD监测。随访期间，前12个月每4-6周采集外周血检测1次。

4. 多克隆结果判读与报告：若检出多个FLT3-ITD克隆，应分别报告每个克隆的VAF及序列信息。目前临床以优势克隆判定MRD水平。同时，专家组建议额外报告所有克隆VAF的总和。

5. 临床应用：使用UHS-NGS检测FLT3-ITD MRD可用于识别复发及死亡风险升高的患者；若存在其他MRD标志物可用，该检测不宜作为随访监测中唯一的MRD检测手段，防止复发时FLT3-ITD转阴导致漏检。移植前后经UHS-NGS检测提示FLT3-ITD MRD 阳性的患者，使用吉瑞替尼维持治疗有效。

需注意：考虑到复发时可能出现FLT3-ITD由阳转阴的情况，随访过程中如条件允许，应同时联合其他方式进行MRD监测。

小结

即使当前基于NGS的FLT3-ITD MRD检测已达超高测序深度，仍无法甄别所有存在复发风险的AML病例。FLT3抑制剂临床应用后，AML复发时会出现新的信号通路基因激活，给基于FLT3-ITD的MRD监测带来新挑战。

因此，FLT3-ITD突变AML必须重视全程动态基因监测：初诊时尽快完成FLT3-ITD分型，明确突变亚型基线；复发时常规复测突变状态，为靶向药物选择、方案调整及后续治疗策略提供精确的分子依据。

见康华美已推出超高灵敏度FLT3-ITD MRD检测项目

项目名称：NPM1与FLT3-ITD 微小残留（MRD）检测

检测内容：根据受检者初诊的NPM1和/或FLT3-ITD检测结果，使用超高灵敏度的NGS方法检测受检者突变位点的残留情况，从而辅助受检者的疗效评估，监测疾病的复发。

参考文献：??

1.         Loo S, Dillon R, Ivey A, et al. Pretransplant FLT3-ITD MRD assessed by high-sensitivity PCR-NGS determines posttransplant clinical outcome. Blood. 2022 Dec 1;140(22):2407-2411. doi: 10.1182/blood.2022016567.

2.         Levis MJ, Hamadani M, Logan BR, et al. Measurable residual disease and posttransplantation gilteritinib maintenance for patients with FLT3-ITD-mutated AML. Blood. 2025 May 8;145(19):2138-2148. doi: 10.1182/blood.2024025154.

3.         Cloos J, Valk PJM, Thiede C, et al. 2025 update on MRD in acute myeloid leukemia: a consensus document from the ELN-DAVID MRD Working Party. Blood. 2026 Mar 12;147(11):1147-1167. doi: 10.1182/blood.2025031480.

作者：陈斌