探索骨髓网状纤维染色：技术解读与临床应用

网状纤维（又称网硬蛋白或嗜银纤维）广泛分布于淋巴造血组织、腺体、实质性器官、血管周围及基底膜等处。因其直径细小且缺乏嗜酸/嗜碱性，常规HE染色难以显现，需借助银染等特殊染色。

在骨髓病理诊断中，网状纤维特殊染色可直观评估其增生程度，是骨髓纤维化（MF）诊断与分级的金标准。

一、正常骨髓中的纤维

骨髓纤维主要包括网状纤维和胶原纤维，是骨髓间质的重要组成部分。

 

 

二、网状纤维染色方法和影响网状纤维评估的主要因素

 

 

 

网状纤维染色方法中，Gomori银染法最常用。其原理为银离子与纤维表面糖蛋白结合形成不溶性银盐，经还原为金属银沉积于纤维表面，使网状纤维呈黑色，胶原纤维呈棕黄色。

 

 

影响评估的主要因素除组织固定、脱钙、包埋等常规因素外，还包括：

• 活检组织过小（＜1.0cm）
• 组织挤压伪影与机械变形
• 切片过厚（高估纤维密度）
• 染色质量差（纤维断裂、碎片化）
• 染色过深（脂肪细胞出现黑/灰边或背景着色）
• 染色过浅（缺乏血管周围网状纤维作为内对照）
• 硝酸银溶液质量不佳（出现颗粒状沉淀或液滴状异常）

 

三、骨髓纤维化的病因、发病机制和病理形态特征

骨髓纤维化是网状纤维和/或胶原纤维异常增生并替代正常造血组织的病理状态，并非独立疾病，而是多种血液系统及非血液系统疾病的共同表现（表1）。可分为原发性（属骨髓增殖性肿瘤）和继发性（继发于血液肿瘤、感染、炎症、自身免疫病、内分泌代谢障碍或实体瘤等）。

表1 骨髓纤维化的病因

其发病机制复杂，通常由特定启动细胞（如巨核细胞/血小板、嗜酸/嗜碱性粒细胞、M2型巨噬细胞、肿瘤细胞、免疫细胞）释放多种促纤维化因子（如TGF-β、PDGF、VEGF等），激活间充质干细胞分化为成纤维细胞和肌成纤维细胞，促进胶原蛋白等细胞外基质的合成与沉积。同时蛋白酶与抑制系统失衡，导致异常沉积的基质无法被有效降解与重塑，从而形成纤维化。

纤维化可呈局灶或弥漫分布，虽缺乏疾病特异性，但可提示骨髓内存在潜在病变（如肿瘤浸润灶）。早期以网状纤维增生为主，表现为网状纤维增多、增粗、交叉成网，骨髓灶性或弥漫性受累。进展期出现胶原纤维沉积，可见无定形粉染基质中散在分布大量或相对稀疏的成纤维细胞，细胞核呈长梭形、深染，有时可呈旋涡状排列。

 

四、骨髓纤维化的评估：基于网状纤维染色的分级系统

骨髓纤维化的评估主要基于网状纤维染色。世界卫生组织（WHO）和国际共识分类（ICC）采用四级分类的MF分级标准（表2），依据网状纤维密度进行半定量评估，该分级结果与临床结局高度相关，不仅可作为包括原发性骨髓纤维化（PMF）在内的骨髓增殖性肿瘤（MPN）的重要诊断依据，也用于评估疾病阶段、判断预后及监测治疗反应。

表2 骨髓纤维化(MF)、胶原纤维化和骨硬化分级(2024 WHO)

具体分级中，MF-0级对应正常骨髓，无纤维增多（图1）；MF-1级为网状纤维轻度增生，形成疏松网络（图2）；MF-2和MF-3级则在密集网状纤维增生的基础上，出现局灶性或弥漫性胶原纤维沉积，并可伴有不同程度的骨硬化（图3、4）。因此，MF-1级至MF-3级属于网状纤维化（reticulin fibrosis），其中MF-1级为轻度纤维化，而MF-2级至MF-3级为明显纤维化，且常伴有胶原纤维沉积，即发生胶原纤维化（collagen fibrosis）。WHO和ICC建议对MF-2级至MF-3级病例进行三色染色以评估胶原纤维情况，并在评估体系中纳入骨硬化程度的判断（表2）。

MF不同分级镜下表现(Gomori染色法)

广义的骨髓纤维化涵盖MF-1级至MF-3级，但临床报告中的“骨髓纤维化”常特指MF-2级与MF-3级，其病理意义更高，且与血象异常及基础疾病严重程度显著相关。在治疗后随访中，网状纤维化往往可逆，而胶原纤维化则多持续存在。联合网状纤维化、胶原纤维化及骨硬化的分级评估，能更全面揭示骨髓基质结构的改变，从而全方位监测MPN的疾病进展与治疗反应。

 

 

五、网状纤维染色在血液病诊断与评估中的应用

 

 

 

 

六、结语

网状纤维染色是骨髓活检病理诊断的常用技术，可量化评估纤维增生程度，为骨髓纤维化诊断提供客观依据。该技术在MPN等髓系肿瘤的诊断和预后判断中具有重要意义，同时对良恶性血液病的鉴别具有辅助价值，并有助于监测疾病进展及识别治疗相关的骨髓基质改变。

为确保结果可靠，需标准化染色流程与质量控制。在JAK抑制剂等具备疾病修饰潜能的药物广泛应用的时代，纤维化的精准分级与分型已成为疗效评估与预后判断的重要环节。

 

 

参考文献：1.   Fibrosis and bone marrow: understanding causation and pathobiology. J Transl Med,2023, 21(1):703.2.   Problems and pitfalls in grading of bone marrow fibrosis, collagen deposition and Osteosclerosis-a consensusbased study.Histopathology ,2016,68(6):905-15.3.   WHO Classification of Tumours- Haematolymphoid tumours,5th ed.IARC Press, 2024.4.   The International Consensus Classification of myeloid and lymphoid neoplasms.1st ed.LWW, 2025.5.   Bone marrow pathology, 5th ed. Hoboken, NJ : Wiley-Blackwell, 2019.6.   网状纤维染色在骨髓活检病理诊断中的意义[J]. 诊断病理学杂志,2002,9(6):334-336.7.   促血小板生成药物临床应用管理中国专家共识（2023年版） [J] . 中华血液学杂志, 2023, 44(7) : 535-542.

 

 

 

 

互动问答（选择题，1-3题为单选题，4题为多选题）

1.         正常骨髓中的网状纤维分布特点是（ ）。

A.仅存在于血管周围，间质中完全不见

B.主要分布于血管周围，间质内亦有少量且形成交叉网络

C.在间质内广泛而密集地分布

D.主要位于血管周围，间质内仅见少量散在的线性纤维，且无交叉

2.         网状纤维化通常对应世界卫生组织（WHO）骨髓纤维化分级中的（ ）。

A.MF-1级

B.MF-2级

C.MF1-2级

D.MF1-3级

3.         下列关于骨髓纤维化分级的描述中，错误的一项是（ ）。

A.MF-0级相当于正常骨髓表现

B.MF-1级为网状纤维轻度增生，不伴有胶原纤维沉积

C.MF-2级表现为疏松的网状纤维增生，伴有多处交叉

D.MF-3级是在显著网状纤维增生的基础上，出现胶原纤维沉积，常伴有骨硬化

4.         以下哪些技术或制片因素可能导致网状纤维分级被高估（ ）？

A.组织挤压伪影

B.切片过厚

C.染色过深

D.染色过浅

 

 

 

 

 

 

答案：1.D 2.D 3.C 4.ABC