EMN最新共识：在多发性骨髓瘤中应用NGS的建议

近期欧洲骨髓瘤网络 (EMN) 发表了NGS在新诊断多发性骨髓瘤 (NDMM) 风险评估中的临床应用共识声明，这一共识标志着多发性骨髓瘤诊疗正迈向更加精准的新时代。

EMN共识四大核心建议

一、NGS应纳入常规临床诊断

主要优势：

• 精准分型：EMN专家一致认为NGS是进行TP53基因分型的首选方法，且能同时识别其他预后不良突变。
• “一站式”解决方案：NGS能同时检测重现性IGH易位和拷贝数变异(CNAs)，进而评估不同患者的个体风险。

建议：对于有条件的实验室，至少应将NGS用于TP53突变的分析。

二、NGS检测panel设计

•  覆盖已被临床验证并广泛用于临床诊疗或风险分层的生物标志物：如R2-ISS分期系统和国际骨髓瘤学会（IMS）标准中的生物标志物。
•  纳入其他预后/预测标志物：包括未被纳入常规风险分层，但具有预后评估或治疗指导潜力的生物标志物，如t(11;14)、BCMA和GPRC5D单/双等位基因缺失与突变、BRAF突变。

三、NGS检测适用人群

EMN专家建议，对于需通过荧光原位杂交（FISH）进行临床预后评估的NDMM患者，可进行NGS检测。

? 核心适用人群：

• 满足高风险临床试验或治疗条件的NDMM患者
• 身体状态较好、能耐受强化治疗的患者
• 即使身体状态较差，但存在“对特定治疗敏感或耐药”（如特定基因突变）的患者

? 建议排除的人群：

• 高龄患者：年龄超出预后评分研究上限的患者
• 身体虚弱或治疗决策不受NGS结果影响的患者

四、复发时NGS检测：必要且重要

NGS适用的复发患者：

身体状况足以接受强化治疗(如CAR-T、T 细胞重定向疗法、抗体药物偶联物或BCL2抑制剂)且临床决策需参考FISH检测结果的复发患者

注：

复发患者的NGS检测靶点应包括FISH关注的继发性遗传学异常 (如del(1p)、del(17p)和1q获得/扩增) 和TP53基因，同时还应纳入CAR-T与双特异性抗体靶点(如BCMA、GPRC5D)

NGS临床应用指南

针对MM的NGS检测，EMN提出了临床应用与分析建议，具体流程如下图所示。

一、 样本来源与检测方法

• 样本来源：CD138富集后的骨髓浆细胞（当细胞数量有限时，应优先进行FISH检测）。
• 检测方法：采用杂交捕获的靶向pull-down方法。

二、 检测panel设计与策略

• 检测范围：同时检测基因突变、拷贝数变异和IGH易位。
• 覆盖范围：倾向于对panel中所有基因的全编码区测序。
• 拷贝数变异分析：推荐利用脱靶区读数（off-target reads）进行分析。
• IGH易位检测：建议靶向IGH的热点区域。

三、 测序与数据分析

• 测序参数：使用双端测序，中位覆盖深度至少200×。
• 变异识别：

①　突变与拷贝数变异：至少使用两种算法进行交叉验证，仅报告共同检出的结果。

②　IGH易位：使用两种算法，任一算法识别出异常即需报告。

    阈值建议：

①　基因突变：变异等位基因频率阈值约5%。

②　拷贝数变异：无需额外设定阈值，所有算法识别出的CNA都应纳入报告。

③　IGH易位：若断点靠近已知致癌基因，即使仅检测到 10 条支持该易位的有效读段，也可判定为真阳性。

四、 报告与验证

报告内容：报告应全面，包含患者与样本信息、检测性能、基因组变异以及针对诊断、预后和治疗的解读。

持续验证：各实验室需将NGS结果与FISH对比进行内部验证，以明确断点读数的具体阈值。

小结

该共识为NGS技术在多发性骨髓瘤风险评估中的规范化应用提供了明确指导，推动了精准诊疗的进一步发展。展望未来，NGS技术将凭借精准的风险分层能力，为多发性骨髓瘤的临床研究与个性化治疗提供关键支撑。