【项目速递】急性髓系白血病患者进行NGS-MRD监测，更精准！

一、AML患者MRD检测的意义重大

急性髓系白血病（AML）是一种来源于造血干细胞的血液系统恶性疾病，目前AML患者长期生存率仍然较低，白血病复发是提高AML疗效的主要瓶颈。研究表明微小残留病（MRD）检测不仅可用于疗效评估、复发预警，还可用于指导治疗方法的选择以及预先干预。因此，MRD检测已成为降低白血病复发、提高疗效的关键环节之一。

对AML而言，MRD是指初诊或难治/复发状态的患者经化疗、靶向治疗、嵌合抗原受体 T 细胞和（或）异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）等治疗获得血液学完全缓解（CHR，骨髓涂片经瑞特-吉姆萨染色，光学显微镜检测原始细胞＜5％）后体内残存的少量白血病细胞¹。

二、AML患者MRD检测的方法

AML患者的MRD检测方法包括多参数流式细胞术（MFC）、实时定量聚合酶链反应（qPCR）、微滴式数字PCR（ddPCR）和二代测序技术（NGS）等。

图1  AML患者MRD监测方法¹

NGS是近些年发展起来的一种高灵敏的MRD监测方法，由于其可监测绝大部分基因突变、灵敏度高等优势，尤其适用于不存在热点融合基因突变的AML患者进行分子MRD的监测。NGS方法不仅灵敏度高，而且能够同时监测多个突变，从而大大提高了阳性检出率，并且可观察克隆演变。

表1. 不同方法检测AML患者MRD的比较²

三、NGS技术应用于AML患者MRD检测的研究成果

近些年已有多项使用NGS技术对AML患者进行MRD检测的研究发表，总结这些文章的研究成果可以发现^3-9：

1. AML患者在首次诱导治疗后、诱导治疗结束后或首次完全缓解 (CR1) 时、首次巩固治疗后或巩固治疗结束时，NGS-MRD阳性均与较差的预后显著相关（更高的累积复发率、更短的无复发生存时间和总生存期）；

2. 相较于MFC-MRD，NGS-MRD是更加灵敏的生物标志物，能够检测到更低水平的白血病克隆残留；

3. CR1时的NGS-MRD的结果可以指导AML患者是否需要接受allo-HSCT治疗；

4. 移植前和移植后1个月的持续性NGS-MRD阳性均与移植后复发及较差的总生存率显著相关；

5.对AML患者外周血样本持续进行NGS-MRD监测，也可提前预测疾病的复发。

表2. NGS技术应用于AML患者MRD检测的研究成果

四、见康华美实验室AML患者NGS MRD监测解决方案

对于AML患者进行NGS MRD监测，见康华美推荐采用个性化定制NGS MRD作为监测方案。根据患者初诊时NGS检测结果，筛选适合进行MRD监测的位点，个性化设计引物后只对这些突变位点进行监测。该方案与固定panel NGS MRD检测方法相比，大大降低了测序数据量的要求，在很少的数据量时即可得到几十万乘的测序深度，进而获得10^-4~10^-5的高灵敏度。再加上该方案可以同时监测多个突变，进而大大提高了阳性检出率。但该方案无法监测那些新发克隆导致的疾病复发，注意结合形态学检查等其他结果共同评估。

见康华美个性化定制的NGS-MRD监测项目：

肿瘤多位点个性化定制MRD监测 (1~3个位点) - 1/3/5/8次；

肿瘤多位点个性化定制MRD监测 (4~6个位点) - 1/3/5/8次；

肿瘤多位点个性化定制MRD监测 (7~9个位点) - 1/3/5/8次；

肿瘤多位点个性化定制MRD监测 (10~12个位点) - 1/3/5/8次；

肿瘤多位点个性化定制MRD监测 (13~15个位点) - 1/3/5/8次。

报告周期：首次送检15个自然日（如遇法定假期顺延），非首次送检7~8个自然日。

标本要求：骨液/外周血3-5ml，EDTA抗凝(紫帽)/枸酸钠抗凝(蓝帽)，2-8℃冷藏运输。

参考文献：

1. Curr Oncol. 2023 Jun; 30(6): 5201–5213. doi: 10.3390/curroncol30060395.

2. 中华医学会血液学分会实验诊断学组, 急性髓系白血病微小残留病检测与临床解读中国专家共识（2021年版）; 中华血液学杂志2021年11月第42卷第11期.

3. Blood Adv. 2021 May 25;5(10):2456-2466. doi: 10.1182/bloodadvances.2020003738.

4. Leukemia. 2021 May;35(5):1392-1404. doi: 10.1038/s41375-021-01131-6. Epub 2021 Feb 8.

5. Blood Cancer J. 2023 Dec; 13(1): 59. doi: 10.1038/s41408-023-00833-7.

6. Blood Cancer J. 2024 Jun 13;14(1):97. doi: 10.1038/s41408-024-01078-8.

7. Blood Cancer J. 2021 Jun 4;11(6):109. doi: 10.1038/s41408-021-00500-9.

8. Bone Marrow Transplant. 2021 May;56(5):1159-1170. doi: 10.1038/s41409-020-01165-x.

9. Blood.2024 Jul 18;144(3):296-307. doi: 10.1182/blood.2023022697.